BCA 蛋白定量試劑盒
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
目前世界上*常用的蛋白濃度檢測(cè)方法是：BCA蛋白定量試劑盒(BCA Protein Assay Kit)和 Bradford 蛋白定量試劑盒(Bradford Protein Assay Kit)。BCA 法與傳統(tǒng)方法相比，更簡(jiǎn)單、更穩(wěn)定、更靈敏。BCA法測(cè)定蛋白濃度兼容性亦很好，不受大部分樣本中其他成分的影響，對(duì)于5%以內(nèi)的SDS、Triton X-100、Tween 20、Tween 80具有很好的兼容性。BCA法測(cè)定蛋白濃度易受螯合劑、高濃度的還原劑影響。在 BCA 法測(cè)定蛋白濃度前，應(yīng)盡量使 EDTA濃度≤m10M; DTT濃度≤1mM，2-ME≤0.01%。
    NobleRyder BCA Protein Assay Kit在50～1000μg/ml濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系，其最小檢出量為25μg/ml。
 NobleRyder BCA蛋白定量試劑盒 

產(chǎn)品組成：
 

 
自備材料：
 
1、酶標(biāo)儀或分光光度計(jì)
2、 96 孔板或離心管
3、恒溫箱
 
操作步驟(僅供參考)：
1. 取適量 5mg/ml 蛋白標(biāo)準(zhǔn)，用 0.9%NaCl 或 PBS 稀釋至終濃度為 0.5mg/ml。稀釋后的 0.5mg/ml 蛋白標(biāo)準(zhǔn)也可以-20℃長(zhǎng)期保存。
2.根據(jù)樣品數(shù)量，按 50 體積 A 液加 1 體積 B 液配制適量 BCA 工作液，充分混勻。例如 5mlA 液加 100µlB 液，混勻，配制成 5.1ml 工作液。工作液室溫 24 小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。
3. 將標(biāo)準(zhǔn)品按 0、1、2、4、8、12、16、20µl 加到 96 孔板的標(biāo)準(zhǔn)品孔中，加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，補(bǔ)足到 20µl。
4. 加適當(dāng)體積樣品到 96 孔板的樣品孔中，加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液到 20µl。
5. 各孔加入 200µlBCA 工作液，37℃放置 30 分鐘。
注：也可以室溫放置 2 小時(shí)，或 60℃放置 30 分鐘。BCA 法測(cè)定蛋白濃度時(shí)，顏色會(huì)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)不斷加深。并且顯色反應(yīng)會(huì)因溫度升高而加快。如果濃度較低，適合在較高溫度孵育，或適當(dāng)延長(zhǎng)孵育時(shí)間。
6. 測(cè)定 A562，540-595nm 之間的波長(zhǎng)也可。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品的蛋白濃度。
 
注意事項(xiàng)：
1. 需酶標(biāo)儀一臺(tái)，測(cè)定波長(zhǎng)為 540-595nm 之間，562nm 優(yōu)良。需 96 孔板。也可以使用普通的分光光度計(jì)測(cè)定，但測(cè)定時(shí)，需根據(jù)比色皿的最小檢測(cè)體積，適當(dāng)加大 BCA 工作液的用量使其不小于最小檢測(cè)體積，樣品和標(biāo)準(zhǔn)品的用量可相應(yīng)按比例放大也可不變。使用分光光度計(jì)測(cè)定蛋白濃度時(shí)，每個(gè)試劑盒可以測(cè)定的樣品數(shù)量可能會(huì)顯著減少。
2. 如發(fā)現(xiàn)樣品稀釋液或裂解液本身就有較高背景，請(qǐng)本公司生產(chǎn)的 Bradford 蛋白濃度測(cè)定試劑盒。
3. 為了加快 BCA 法測(cè)定蛋白濃度的速度可以適當(dāng)用微波爐加熱，但是切勿過(guò)熱。
4.EDTA濃度必需小于 10mM，不兼容 EGTA。
5. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿戴實(shí)驗(yàn)服和一次性手套。
 
有效期： 12 個(gè)月有效。蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液-20℃凍存。
 

NobleRyder BCA蛋白定量試劑盒