詳細介紹
抗VGLUT1,豚鼠
Anti VGLUT1, Guinea Pig
VGLUT(Vesicular Glutamate Transporter)是將哺乳類興奮性突觸傳遞中主要的神經(jīng)遞質谷-氨酸轉運至突觸囊泡的轉運蛋白,研究認為它轉運谷-氨酸時利用了質子電化學梯度。目前已在哺乳動物中發(fā)現(xiàn)VGLUT1、VGLUT2 和 VGLUT3三種亞型,它們的表達部位各不相同, VGLUT1主要在大腦皮層和海馬體表達,VGLUT2在丘腦、下丘腦和杏仁核等部位表達。而表達VGLUT3的神經(jīng)元很少,有報告稱,根據(jù)mRNA表達模式推斷,VGLUT3分布于紋狀體、海馬體、大腦皮層、中縫核等部位1)。在神經(jīng)科學領域中,抗VGLUT抗體也被用作谷-氨酸能神經(jīng)元的標記抗體。
“抗VGLUT1,豚鼠"是豚鼠來源的抗VGLUT1多克隆抗體,可用于免疫組化染色的多重染色。
◆抗體信息
抗體種類 | 多克隆抗體 |
抗原 | 大鼠VGLUT1的重組蛋白(C端序列相同) |
免疫動物 | 豚鼠 |
組成 | 使用PBS稀釋抗血清 |
標記 | 未標記 |
交叉性 | 小鼠、大鼠 |
應用 | 免疫組織染色(冰凍切片)1:1,600 |
◆Protocol(示例)
1. 灌注固定:使用0.1%檸檬酸鈉/PBS灌注除血后,4% PFA灌注
2. 后固定: 4% PFA (4 h)
3. 蔗糖替換:30%蔗糖/PBS(4℃,過夜~約2天)
4. 制備冰凍切片:去除蔗糖后,制備冰凍包埋塊,并用低溫切片機制備30 μm厚的切片
5. 甘-氨酸處理:25 mM甘-氨酸PBS(20 min左右)
6. 封閉:5% 正常山羊血清,0.3% Triton X-100/PBS(4℃,過夜)
7. 一抗:抗VGLUT1, 豚鼠(1︰1,600),1% 正常山羊血清,0.3% TritonX-100/PBS(4℃,過夜~2 天)
8. 清洗:0.3% TritonX-100/PBS (5 min×3次)
9. 二抗:Alexa Fluor® 488 AffiniPure Goat Anti-Guinea Pig IgG (H+L) (1:1,600) (產品編號: 568-77901),
1% 正常山羊血清,0.3% TritonX-100/PBS (室溫,2 h)
10. 清洗:0.3% TritonX-100/PBS (5 min×3次)
11. 封裝: 4℃下避光存儲
◆數(shù)據(jù)
應用數(shù)據(jù)
▼ 免疫組化染色
物種:小鼠;部位:海馬體;樣品:冰凍切片;抗體濃度:1:1,600
<數(shù)據(jù)提供> 京都工藝纖維大學 應用生物學系 宮田老師
神經(jīng)細胞的染色使用NeuroTrace™ 435/455 Blue Fluorescent Nissl Stain(ThermoFisher Scientific, Inc.)
◆Q&A
關于Protocol
Q:使用哪種二抗比較好?
A:FUJIFILM Wako擁有以下二抗的實績:
Alexa Fluor® 488 AffiniPure Goat Anti-Guinea Pig IgG (H+L)(Jackson ImmunoResearch公司,產品編號:568-77901)
關于應用
Q:可以用于什么動物?
A:已確認可用于小鼠和大鼠,暫未確認是否可用于其他動物。
◆參考文獻
1.Gras, C. et al.: J. Neurosci., 22(13), 5442(2002).
A third vesicular glutamate transporter expressed by cholinergic and serotoninergic neurons
◆產品列表
產品編號 | 產品名稱 | 產品規(guī)格 | 產品等級 |
013-28811 | 抗VGLUT1,豚鼠 Anti VGLUT1, Guinea Pig | 50 μL | 免疫化學用 |