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當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>天然蛋白、重組蛋白>>活性蛋白/AP>> 酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)活性蛋白
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所 在 地上海市
更新時間:2023-03-23 08:42:10瀏覽次數(shù):416次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
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主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Active Acid Sphingomyelinase (ASM) |
種屬 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)活性蛋白 | Active Acid Sphingomyelinase (ASM) | Mus musculus (Mouse,小鼠) |
商品介紹:
SMPD1; NPD; SMase; aSMase; Sphingomyelin Phosphodiesterase 1,Acid Lysosomal; Simply Sphingomyelinase 酶與激酶 代謝通路 神經(jīng)科學 物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.) 性狀:凍干粉 純度:> 97% 等電點:6.9 應用:Cellculture;ActivityAssays. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
相關產(chǎn)品:
谷丙轉氨酶(ALT)重組蛋白Recombinant Aminopeptidase A (ENPEP)
谷氨酰脯氨酰tRNA合成酶(EPRS)重組蛋白Recombinant N-Acylsphingosine Amidohydrolase 2 (ASAH2)
谷氨酰tRNA合成酶2(EARS2)重組蛋白Recombinant Protein Kinase C Theta (PKCq)
脫羧酶樣蛋白1(GADL1)重組蛋白Recombinant Aminopeptidase B (RNPEP)
注意事項:
1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。
2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結果。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。
4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
H2BFWT產(chǎn)品名稱: H2B組蛋白家族成員W蛋白抗體(睪丸特異性)交叉反應: Human
英文名稱: Myoglobin英文別名: MYO; MB; MGC13548; PVALB; MYG_HUMAN.
Cappucci產(chǎn)品名稱: Cappucci蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep, GuineaPig
PARG產(chǎn)品名稱: 聚ADP核糖水解meiPARG抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
CRIM1產(chǎn)品名稱: 富含半胱氨suan運動神經(jīng)元蛋白1抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat
KLC3產(chǎn)品名稱: 驅(qū)動蛋白輕鏈3抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Cow, Horse
factor V產(chǎn)品名稱: 凝因子5抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig
PDE6B產(chǎn)品名稱: 磷suan二酯mei6β抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat
ornithine amitransferase產(chǎn)品名稱: 鳥氨suan氨基轉移mei抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Horse
GJB3產(chǎn)品名稱: 間隙連接蛋白31抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, GuineaPig
酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)活性蛋白兔血清總補體(CH50)ELISA試劑盒CH50兔血清總補體elisa kitRabbit 50% complement hemolysis,CH50 ELISA Kit
兔血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒SAA兔血清淀粉樣蛋白AELISA試劑盒Rabbit Serum amyloid A,SAA ELISA Kit
兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒GMP-140兔血漿α顆粒膜蛋白elisamei聯(lián)免疫試劑盒Rabbit alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA Kit
兔血紅su氧合mei1(HMOX1)ELISA試劑盒HMOX1兔血紅su氧合mei1elisa檢測試劑盒Rabbit heme oxygenase(decycling)1,HMOX1 ELISA kit
兔血紅蛋白(HB)ELISA試劑盒HB兔血紅蛋白elisa kitRabbit HB ELISA Kit
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