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酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)活性蛋白

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2023-03-23 08:42:10瀏覽次數(shù):416次

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供貨周期 現(xiàn)貨 應用領域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實驗 英文名稱 Active Acid Sphingomyelinase (ASM)
種屬 Mus musculus (Mouse,小鼠) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
品牌 研生
酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)活性蛋白的相關產(chǎn)品:內(nèi)皮型一氧化氮合mei(eNOS)重組蛋白英文名稱:Recombina Endothelial NOS (eNOS)肌球蛋白輕鏈激mei(MYLK)重組蛋白英文名稱:Recombina Myosin Light Chain Kinase (MYLK)加溶金屬1(MP1)重組蛋白英文名稱:Recombina Pitrilysin Metalloprote

公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

產(chǎn)品名稱

英文名稱

物種

酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)活性蛋白

Active Acid Sphingomyelinase (ASM)

Mus musculus (Mouse,小鼠)

商品介紹:

SMPD1; NPD; SMase; aSMase; Sphingomyelin Phosphodiesterase 1,Acid Lysosomal; Simply Sphingomyelinase

酶與激酶

代謝通路

神經(jīng)科學

物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度:> 97%

等電點:6.9

應用:Cellculture;ActivityAssays.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg   

蛋白表達及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

圖片5.png

圖片1.png


相關產(chǎn)品:

谷丙轉氨酶(ALT)重組蛋白Recombinant Aminopeptidase A (ENPEP)

谷氨酰脯氨酰tRNA合成酶(EPRS)重組蛋白Recombinant N-Acylsphingosine Amidohydrolase 2 (ASAH2)

谷氨酰tRNA合成酶2(EARS2)重組蛋白Recombinant Protein Kinase C Theta (PKCq)

脫羧酶樣蛋白1(GADL1)重組蛋白Recombinant Aminopeptidase B (RNPEP)   

注意事項:

1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結果。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作                                            

操作步驟:

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細胞洗滌后,轉至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

細胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

H2BFWT產(chǎn)品名稱: H2B組蛋白家族成員W蛋白抗體(睪丸特異性)交叉反應: Human

英文名稱: Myoglobin英文別名: MYO; MB; MGC13548; PVALB; MYG_HUMAN.

Cappucci產(chǎn)品名稱: Cappucci蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep, GuineaPig

PARG產(chǎn)品名稱: 聚ADP核糖水解meiPARG抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

CRIM1產(chǎn)品名稱: 富含半胱氨suan運動神經(jīng)元蛋白1抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat

KLC3產(chǎn)品名稱: 驅(qū)動蛋白輕鏈3抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Cow, Horse

factor V產(chǎn)品名稱: 凝因子5抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig

PDE6B產(chǎn)品名稱: 磷suan二酯mei6β抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat

ornithine amitransferase產(chǎn)品名稱: 鳥氨suan氨基轉移mei抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Horse

GJB3產(chǎn)品名稱: 間隙連接蛋白31抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, GuineaPig   

酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)活性蛋白兔血清總補體(CH50)ELISA試劑盒CH50兔血清總補體elisa kitRabbit 50% complement hemolysis,CH50 ELISA Kit

兔血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒SAA兔血清淀粉樣蛋白AELISA試劑盒Rabbit Serum amyloid A,SAA ELISA Kit

兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒GMP-140兔血漿α顆粒膜蛋白elisamei聯(lián)免疫試劑盒Rabbit alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA Kit

兔血紅su氧合mei1(HMOX1)ELISA試劑盒HMOX1兔血紅su氧合mei1elisa檢測試劑盒Rabbit heme oxygenase(decycling)1,HMOX1 ELISA kit

兔血紅蛋白(HB)ELISA試劑盒HB兔血紅蛋白elisa kitRabbit HB ELISA Kit 


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