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蛋白激酶R(PKR)活性蛋白

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-03-22 22:21:52瀏覽次數(shù):552次

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供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Active Protein Kinase R (PKR)
物種 Homo sapiens (Human,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
品牌 研生
蛋白激酶R(PKR)活性蛋白公司正在出售的產(chǎn)品:牛結(jié)核分歧桿菌(MB)核suan檢測試劑盒牛副結(jié)核分歧桿菌(MPB)核suan檢測試劑盒布氏桿菌(BS)核suan檢測試劑盒貓瘟病毒(FPV)核suan檢測試劑盒牛結(jié)核分枝桿菌PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)麻疹病毒和風(fēng)疹病毒PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)類鼻疽伯克霍爾德菌PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)副溶血弧菌TDH基因PCR檢測試劑盒(熒光P

公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱:蛋白激酶R(PKR)活性蛋白   

物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱:Active Protein Kinase R (PKR)

PRKR; PRK-R; EIF2AK2; EIF2AK1; Eukaryotic Translation Initiation Factor 2 Alpha Kinase 2; Interferon-induced, double-stranded RNA-activated protein kinase; P1/eIF-2A kinase

酶與激酶

細(xì)胞凋亡

感染免疫

物種:Homo sapiens (Human,人)

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 80%

等電點(diǎn):8.9

應(yīng)用:Cellculture;ActivityAssays.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

特點(diǎn):

標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡單、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡便、直接的標(biāo)記方法。

酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,其應(yīng)用范圍非常廣泛,結(jié)果即時(shí)可見、敏感性高。

熒光標(biāo)記:熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法。

相關(guān)產(chǎn)品:
甲硫氨酰tRNA合成酶(MARS)重組蛋白R(shí)ecombinant Protein Kinase D2 (PKD2)

甲基轉(zhuǎn)移酶樣蛋白21C(METTL21C)重組蛋白R(shí)ecombinant Monoamine Oxidase A (MAOA)

加溶金屬蛋白酶1(MP1)重組蛋白R(shí)ecombinant Quiescin Q6 Sulfhydryl Oxidase 1 (QSOX1)

己糖激酶3(HK3)重組蛋白R(shí)ecombinant Protein Interacting With C Kinase 1 (PICK1)

圖片6.png

標(biāo)簽選擇:

親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

a.      選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)

b.      表達(dá)載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染

e.      表達(dá)小試,條件優(yōu)化

f.       表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)

g.      大量表達(dá)

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

a.      選擇表達(dá)載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株

e.      蛋白表達(dá)小試分析

f.       如果蛋白可溶,蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白;表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測

  誘導(dǎo)表達(dá)成功后,表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測應(yīng)該順當(dāng),按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒太大的問題。

HLA-F產(chǎn)品名稱: 組織相容性抗原HLAF單克隆抗體交叉反應(yīng): Human

MOBKL2A產(chǎn)品名稱: MOBKL2A蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Zebrafish

SALL4產(chǎn)品名稱: 鋅指轉(zhuǎn)錄蛋白Sall4抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep

DNTTIP1產(chǎn)品名稱: 末端脫氧核苷suan轉(zhuǎn)移mei相互作用蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

HE4產(chǎn)品名稱: 附睪分泌蛋白4抗體交叉反應(yīng): Mouse, Rat

GNAI1產(chǎn)品名稱: G蛋白α交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Zebrafish, Sheep

OR5J2產(chǎn)品名稱: 嗅覺受體5J2抗體交叉反應(yīng): Human

ADM產(chǎn)品名稱: 腎上髓質(zhì)su抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse

CRBP2產(chǎn)品名稱: 結(jié)合蛋白2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

NG2產(chǎn)品名稱: 黑色su軟骨su蛋白多糖抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, GuineaPig
蛋白激酶R(PKR)活性蛋白大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒MCP-2/CCL8單核細(xì)胞趨化蛋白2elisa kitRat monocyte chemotactic protein 2,MCP-2 ELISA Kit

大鼠遲現(xiàn)抗原(VLA)ELISA試劑盒VLA遲現(xiàn)抗原elisa檢測試劑盒Rat very late appearing antigen,VLA ELISA Kit

大鼠層粘蛋白α1(LAMA1)ELISA試劑盒LAMA1層粘蛋白α1elisa kitRat Laminin alpha 1,LAMA1 ELISA Kit

大鼠補(bǔ)體因子D(adipsin)(CFD)ELISA試劑盒adipsin補(bǔ)體因子DELISA試劑盒Rat complement factor D(adipsin),CFD ELISA kit

大鼠補(bǔ)體片斷5(C5)ELISA試劑盒C5補(bǔ)體片斷5elisamei聯(lián)免疫試劑盒Rat Complement fragment 5,C5 ELISA Kit
操作步驟

根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。

1、樣品前處理:

a)對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。

b)對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,然后再裂解。

c)對(duì)于組織樣品: 把切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

2、后處理:

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作


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