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關(guān)于重組蛋白,你真的了解它嗎?

閱讀:580      發(fā)布時(shí)間:2024-6-19
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重組蛋白是指利用DNA重組技術(shù)或重組RNA技術(shù)從而獲得并生產(chǎn)的蛋白質(zhì)。具體操作流程可以概括為利用中心法則采用基因重組分子克隆技術(shù),獲得可以翻譯成目的蛋白的基因片段的重組載體,之后將其轉(zhuǎn)入可以表達(dá)目的蛋白的宿主細(xì)胞從而表達(dá)特定的重組蛋白分子。重組蛋白獲得的途徑分為體內(nèi)和體外生產(chǎn),表達(dá)系統(tǒng)主要分為原核表達(dá)系統(tǒng)和真核表達(dá)系統(tǒng)。原核表達(dá)系統(tǒng)最常見的是利用大腸桿菌進(jìn)行表達(dá),真核表達(dá)系統(tǒng)主要為酵母蛋白表達(dá)、哺乳動(dòng)物細(xì)胞蛋白表達(dá)(常用的細(xì)胞為CHO細(xì)胞、HEK293細(xì)胞)、昆蟲細(xì)胞蛋白表達(dá)。

 

圖 重組蛋白四大表達(dá)系統(tǒng)

 

重組蛋白技術(shù)主要用于科學(xué)研究、生物制藥、疫苗開發(fā)以及診斷試劑研發(fā)等領(lǐng)域,能夠大量生產(chǎn)具有特定生物學(xué)活性、藥理活性或科研價(jià)值的蛋白質(zhì),例如細(xì)胞因子、激素、酶、抗體(包括單克隆抗體)、治療性蛋白以及其他功能性蛋白等。迄今為止,已有超過130種重組蛋白獲得美國FDA批準(zhǔn)用于臨床,然而,世界有超過170種重組蛋白被生產(chǎn)和用于醫(yī)學(xué)。重組蛋白是有效的藥物,不會(huì)產(chǎn)生脫靶副作用,而且比小分子藥物的開發(fā)時(shí)間更短,克服了傳統(tǒng)提取方法產(chǎn)量低、純度難以控制的問題。現(xiàn)在所有大型制藥公司都將重組蛋白作為藥物來開發(fā),經(jīng)過30余年發(fā)展,重組蛋白藥物已成為現(xiàn)代生物制藥領(lǐng)域最重要的產(chǎn)品之一,占據(jù)生物藥市場三分之一以上的份額。根據(jù)Frost&Sullivan數(shù)據(jù),在中國,重組蛋白生物科研試劑總體市場從2016年的5億元增長到2019年的9億元,期間年復(fù)合增長率為20.0%,預(yù)計(jì)2024年市場規(guī)模將達(dá)到19億元,2019年至2024年間年復(fù)合增長率為17.9%。盡管我國重組蛋白技術(shù)起步較晚,隨著國內(nèi)技術(shù)水平的提升和市場競爭的加劇,國產(chǎn)替代的進(jìn)程有望加快。

 

重組蛋白生產(chǎn)流程:

 

1)獲取cDNA并創(chuàng)建表達(dá)克隆:首先需要獲取目標(biāo)蛋白質(zhì)的cDNA序列,并將其克隆到表達(dá)載體中,以便于在宿主細(xì)胞中表達(dá);

2)克隆:將含有目標(biāo)蛋白基因的表達(dá)載體轉(zhuǎn)移到宿主細(xì)胞中;

3)在合適的系統(tǒng)中表達(dá)蛋白質(zhì):選擇合適的宿主細(xì)胞系統(tǒng)進(jìn)行蛋白質(zhì)的表達(dá),表達(dá)系統(tǒng)可以是大腸桿菌、酵母、哺乳動(dòng)物細(xì)胞等;

4)小規(guī)模試驗(yàn)表達(dá):在小規(guī)模條件下進(jìn)行蛋白質(zhì)的表達(dá)試驗(yàn),以確定表達(dá)條件和蛋白質(zhì)的產(chǎn)量;

5)蛋白純化:通過各種層析技術(shù),如離子交換層析、凝膠過濾層析、親和層析等,從宿主細(xì)胞的裂解物中純化出目標(biāo)蛋白質(zhì);

6)質(zhì)量控制:對純化后的蛋白質(zhì)進(jìn)行表征,包括其分子大小、純度、活性等;

7)擴(kuò)大生產(chǎn):如果需要大量重組蛋白,可以通過在生物反應(yīng)器中培養(yǎng)轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞來擴(kuò)大生產(chǎn)過程。生物反應(yīng)器為細(xì)胞生長和大規(guī)模重組蛋白生產(chǎn)提供了受控環(huán)境。

 

常見重組蛋白類型:

 

重組蛋白的類型包括治療蛋白、工業(yè)酶、診斷蛋白、研究工具、疫苗、生物材料、生物工程、生物傳感器和生物催化劑。已被廣泛應(yīng)用于蛋白結(jié)構(gòu)研究、免疫檢測試劑、重組蛋白藥物、診斷試劑開發(fā)、抗體藥物靶點(diǎn)、CAR-T 細(xì)胞治療靶點(diǎn)、Fc 受體、流感病毒蛋白和細(xì)胞因子等大多數(shù)熱門研究領(lǐng)域。下面給大家介紹比較熱門的重組蛋白。

 

1、白細(xì)胞介素(Interleukin, IL)

由多種細(xì)胞產(chǎn)生并作用于多種細(xì)胞的一類細(xì)胞因子。IL在傳遞信息,激活與調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞,介導(dǎo)T、B細(xì)胞活化、增殖與分化及在炎癥反應(yīng)中起重要作用,是淋巴因子(1ymphokins)家族中的成員,由淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等產(chǎn)生。白細(xì)胞介素都是通過與靶細(xì)胞表面的細(xì)胞因子受體特異性結(jié)合來發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng),這些效應(yīng)包括促進(jìn)靶細(xì)胞的增殖和分Chemicalbook化,增強(qiáng)抗感染和殺傷腫瘤細(xì)胞效應(yīng),促進(jìn)或抑制其他細(xì)胞因子合成,促進(jìn)炎癥過程,影響細(xì)胞代謝等。

 

Absin白細(xì)胞介素類重組蛋白產(chǎn)品清單

貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

abs00970

Recombinant Mouse IL-2 Protein

5ug

abs00971

Recombinant Mouse IL-3 Protein

10ug

abs00975

Recombinant Mouse IL-7 Protein

10ug

abs00985

Recombinant Mouse IL-33 Protein

10ug

abs04100

Recombinant Mouse IL‐2 Protein

10ug

abs04697

Recombinant Mouse IL-4 Protein

10ug

abs04044

Recombinant Human IL-6 Protein

10ug

abs04045

Recombinant Human IL-2 Protein

10ug

abs04046

Recombinant Human IL-15 Protein

10ug

abs04047

Recombinant Human IL-17A Protein

10ug

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2、干擾素(interferon, IFN)

干擾素是一組具有多種功能的活性蛋白質(zhì)(主要是糖蛋白),是一種由單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子。它們在同種細(xì)胞上具有廣譜的抗病毒、影響細(xì)胞生長,以及分化、調(diào)節(jié)免疫功能等多種生物活性。

 

Absin干擾素類重組蛋白產(chǎn)品清單

貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

abs00809

Recombinant Human IL-7 Protein

10ug

abs00918

Recombinant Human IL-29 Protein

5ug

abs05109

Recombinant Human IFN-γ Protein(C-10His)

50ug

abs04123

Recombinant Human IFN-γ Protein(E.coli)

10ug

abs01021

Recombinant Mouse IFN-γ Protein

100ug

abs04127

Recombinant Mouse IFNγ Protein(E.coli)

10ug

abs04129

Recombinant Mouse Interferon α-2 Protein

10ug

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3、集落刺激因子(colony stimulating factor, CSF)

一組在體內(nèi)外均可選擇性刺激造血祖細(xì)胞增殖、分化并形成某一譜系細(xì)胞集落的細(xì)胞因子,包括巨噬細(xì)胞CSF、粒細(xì)胞CSF、巨噬細(xì)胞/粒細(xì)胞CSF、干細(xì)胞因子等。

 

Absin集落刺激因子類重組蛋白產(chǎn)品清單

貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

abs04383

Recombinant Mouse CSF1 Protein

10ug

abs00994

Recombinant Mouse GM-CSF Protein

5ug

abs00839

Recombinant Human GM-CSF Protein

100ug

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4、生長因子(growth factor, GF)

一類可介導(dǎo)不同類型細(xì)胞生長和分化的細(xì)胞因子,根據(jù)其功能和所作用細(xì)胞的不同,分別命名為轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)、神經(jīng)生長因子(NGF)、表皮生長因子(EGF)、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)、成纖維細(xì)胞生長因子(FGF)等。

 

Absin生長因子類重組蛋白產(chǎn)品清單

貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

abs04176

Recombinant Human Epidermal Growth Factor Protein

10ug

abs04204

Recombinant Human TGFB1 Protein

10ug

abs05144

Recombinant Human FGF-basic (154aa) Protein

10ug

abs05161

Recombinant Human VEGF165 Protein

10ug

abs01006

Recombinant Mouse bFGF Protein

10ug

abs04222

Recombinant Mouse TGF-β1 Protein

10ug

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5、趨化性細(xì)胞因子(chemokine)

一類對不同靶細(xì)胞具有趨化效應(yīng)的細(xì)胞因子家族,可由白細(xì)胞和某些組織細(xì)胞分泌,是一個(gè)包括60多個(gè)成員的蛋白質(zhì)家族。大部分成員含4個(gè)保守的半胱氨酸(cysteine, C)根據(jù)其N端半胱氨酸的排列方式,可分為CXC、CC、C、CX3C四個(gè)亞族。

 

Absin趨化性細(xì)胞因子類重組蛋白產(chǎn)品清單

貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

abs00810

Recombinant Human IL-8,72a.a.

5ug

abs04159

Recombinant Mouse CXCL12 Protein

10ug

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6、腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor, TNF)

由于在體內(nèi)外均可直接殺傷腫瘤細(xì)胞而得名。主要成員包括:

1)TNF-α,一種單核因子主要由單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生;

2)TNF-β,一種淋巴因子,主要由淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞等產(chǎn)生,其生物學(xué)活性與TNF-α相類似。

 

Absin腫瘤壞死因子類重組蛋白產(chǎn)品清單

貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

abs04294

Recombinant Mouse TNFSF11 Protein

10ug

abs05092

Recombinant Human TNF-α Protein

50ug

abs05160

Recombinant Human TNF-α Protein

100ug

abs04232

Recombinant Human TNF-α Protein

10ug

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7、CD抗原類

白細(xì)胞表面的抗原被稱為CD抗原(亦稱白細(xì)胞分化抗原),其對生物體的免疫反應(yīng)起著重要的作用。隨著淋巴細(xì)胞成熟,他們在細(xì)胞表面表達(dá)不同的蛋白質(zhì)受體,它可以幫助確定被檢查細(xì)胞的類型和成熟階段。

 

Absin CD抗原類重組蛋白產(chǎn)品清單

貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

abs04571

Recombinant Mouse CD275 Protein(C-6His)

10ug

abs04611

Recombinant Human CD58 Protein(C-Fc)

10ug

abs04618

Recombinant Cynomolgus CD274 Protein(C-6His)

10ug

abs04721

Recombinant Human PD-1 Fc Chimera Protein(C-Fc)

25ug

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8、病毒抗原/蛋白

一個(gè)完整的病毒粒子由其遺傳物質(zhì)(DNA或RNA)和蛋白外殼構(gòu)成。構(gòu)成成熟的病毒粒子的蛋白,即病毒結(jié)構(gòu)蛋白,可能包括核衣殼核心蛋白(gag蛋白)、病毒顆粒內(nèi)包裝的酶(pol蛋白)和膜組分 (env蛋白)。另外,病毒蛋白組還包括了非結(jié)構(gòu)蛋白、調(diào)節(jié)蛋白和輔助蛋白。這些蛋白在感染細(xì)胞時(shí)病毒復(fù)制以及病毒復(fù)制和組裝調(diào)節(jié)中發(fā)揮了重要作用。愛必信提供多種重組病毒蛋白,助力病毒研究。

 

Absin病毒抗原/蛋白產(chǎn)品清單

貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

abs01313

Recombinant HBV Surface Antigen(adr) Protein

100ug

abs03000

滅活Sabin株脊髓灰質(zhì)炎病毒1型抗原

25uL

abs03057

重組乙肝病毒表面抗原HBsAg抗原

500ul

abs04732

Recombinant SARS-CoV-2 Spike S1 Protein(C-His)

100ug

 






9、酶和調(diào)節(jié)子

酶類是在生物系統(tǒng)內(nèi)發(fā)現(xiàn)的生物催化劑,能催化特定的生化過程。大多數(shù)酶是具有催化活性的蛋白質(zhì),部分RNA分子(核酶)也具有催化活性。發(fā)生在所有生物機(jī)體內(nèi)的生物過程都是化學(xué)反應(yīng),且大多數(shù)是由酶調(diào)節(jié)的。許多遺傳性的人類疾病,如白化病和苯bing酮尿癥,都是由缺乏特殊的酶引起的。多毒素或活性藥物通過抑制特定的酶促反應(yīng)發(fā)揮作用。

 

Absin酶和調(diào)節(jié)子產(chǎn)品清單

貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

abs04301

Recombinant Human PTH Protein(1-84)

10ug

abs04756

Recombinant Human ACE2 Protein(C-His-Avi)

100ug

abs06069

Recombinant Schistosoma Japonicum GST Protein(C-10His)

50ug

 





10、免疫檢查點(diǎn)蛋白

免疫檢查點(diǎn)(ICP)分子指的是對免疫應(yīng)答發(fā)揮抑制或刺激作用的配體-受體對。免疫檢查點(diǎn)在維持免疫穩(wěn)態(tài)和預(yù)防自身免疫中起著重要的免疫調(diào)節(jié)作用。大多數(shù)被報(bào)道的免疫檢查點(diǎn)蛋白表達(dá)于適應(yīng)性免疫系統(tǒng)的細(xì)胞,特別是T細(xì)胞和先天免疫系統(tǒng)。

 

Absin 免疫檢查點(diǎn)蛋白產(chǎn)品清單


貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

abs01295

Recombinant Human Galectin-3 Protein

10ug

abs04602

Recombinant Human Galectin 9 Protein(C-6His)

50ug

abs05507

Recombinant Biotinylated Human CTLA4 Protein(Avi Tag,His Tag)

100ug




 

Absin還專業(yè)提供多種重組蛋白如細(xì)胞間基質(zhì)蛋白、修飾酶、血管生成素、熒光蛋白、載脂蛋白、脂肪因子、轉(zhuǎn)錄因子、CAR-T 相關(guān)蛋白、IVD抗原蛋白、免疫球蛋白------- 點(diǎn)擊鏈接查看更多重組蛋白產(chǎn)品

 

Recombinant Human IL-15 Protein(abs05147)

 

白細(xì)胞介素-15(IL-15)是1994年發(fā)現(xiàn)的一種支持細(xì)胞毒性免疫細(xì)胞穩(wěn)態(tài)的細(xì)胞因子,具有廣泛的生物活性。IL-15能刺激活化的T細(xì)胞增殖,促進(jìn)細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(如CD8+)的誘導(dǎo),促進(jìn)NK細(xì)胞的產(chǎn)生、增殖和活化。因此,IL-15與其他藥物如檢查點(diǎn)抑制劑、單克隆抗體、化療、放療、CAR-T細(xì)胞等聯(lián)合應(yīng)用于迅速擴(kuò)大的癌癥免疫治療領(lǐng)域,以靶向多種機(jī)制,增強(qiáng)對腫瘤的免疫應(yīng)答,為控制和治療癌癥提供優(yōu)勢。

 

產(chǎn)品特征:


種屬

來源

E.coli

分子量

12kDa(Reducing)

外觀

凍干粉

序列

Asn49-Ser162

NWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGD
ASIHDTVENLIILANNSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTS

純度

>95% SDS-PAGE

內(nèi)毒素水平

<1EU/μg(LAL)

活性

EC50<1ng/mL




 

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

 

劑量依賴性刺激CTLL-2增殖的EC50<1ng/mL


Absin產(chǎn)品線:

爆款產(chǎn)品:試劑盒(mIHC、IHC、凋亡、ELISA、ChIP、Co-IP、TR-FRET、生化檢測、殘留檢測、多因子檢測);細(xì)胞培養(yǎng)(類器官試劑盒+基質(zhì)膠,胎牛血清+培養(yǎng)添加劑+細(xì)胞因子)、分化試劑盒;分子(mRNA合成服務(wù)+提取試劑盒);化合物大包裝;輔助試劑、耗材/儀器、定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標(biāo)記/檢測)...

特色產(chǎn)品:雞胚提取物CEE、B27、N2、霍亂毒素B亞單位CTB、牛腦垂體提取物BPE、百日咳毒素PTX、重組人胰島素Insulin、人源低密度脂蛋白LDL...


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