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詳細介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：巴爾通體通用染料法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號：FS-P013539
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
Laminin alpha5/FITC 熒光標記層粘蛋白α5抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Socs 3/FITC 熒光標記細胞因子信號傳導抑制蛋白3抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh AKR1B1 糖還原抗體 0.2ml
Rabbit horse IgG/Gold 膠體金標記的兔抗馬IgG 0.5ml
GPR158 G蛋白偶聯(lián)受體GPR158蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgM/RBITC 羅丹明標記的兔抗羊IgM 0.3ml
Socs 3/FITC 熒光標記細胞因子信號傳導抑制蛋白3抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
sVE-Cadherin (Human Vascular Endothelial-Cadherin Complex) ELISA Kit 人血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復合體Multi-class antibodies： 48T
PAG608 p53活化基因608單克隆抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh HSD3B1 滋養(yǎng)層細胞抗原3β-HSD抗體 0.1ml
T3(Mouse Tri-iodothyronine)ELISA Kit 小鼠狀腺原 96T
Proteasome 20S alpha 3(Ser250) 磷化蛋白體PSMα3抗體 0.1ml
Chordin 原腸胚雙向形成相關蛋白抗體 0.2ml
PAG608 p53活化基因608單克隆抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Donkey human IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的驢抗人IgG 0.1ml
GCAP2 鳥苷環(huán)化激活蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARSF 芳香基酯F抗體 0.2ml
IDE/FITC 熒光標記胰島降解抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgG/HRP 辣根過氧化物標記的兔抗猴IgG 0.1ml
PKN2 /FITC 熒光標記蛋白激N2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
巴爾通體通用染料法熒光定量PCR試劑盒50次刺糖多孢菌種屬: Saccharopolyspora│spinosa提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 609生長條件: 28-30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
土地鹽紅菌種屬: Halorubrum│terrestre提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0212生長條件: 37℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
香菇種屬: Lentinula│edodes提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 食用培養(yǎng)基: 0017生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
維涅蘭德固氮菌種屬: Azotobacter│vinelandii提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: C*tion (3363). Fixes nitrogen. Preservation (3363).培養(yǎng)基: 0063生長條件: 30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法；礦物油法；定期移植法
白介6(IL-6)ELISA試劑盒N-2-哌-N'-2-乙磺鈉鹽 99.5%L-亮氨乙酯鹽鹽 99%氫鋁(>98%,BR)
白介5受體alpha(IL5RA)ELISA試劑盒磺鈉 98%L-亮氨甲酯鹽鹽 98%銨三(>98%,BR)
白介-5(IL-5)ELISA試劑盒對羥基甲鈉 CP,98%4'-甲氧基酮 99%碳鋇(>99%,BR)
白介5(IL-5)ELISA試劑盒對羥基甲鈉 99%對酮 96%甲酰(>98%,BR)
白介4受體(IL4R/CD124)ELISA試劑盒N-2-哌-N'-2-乙磺 99%香豆靈甲酯 98%比布里希猩紅(>90%,BS)
白介4(IL-4)ELISA試劑盒魯米諾 98%4-甲基-2-氧戊 98%檸檬鈣；檸檬鈣四
白介37(IL-37)ELISA試劑盒3-(N-啉)磺鈉 99.5%(T)6-硝基吲唑 98%硫銫(分子生物學級)
白介35(IL-35)ELISA試劑盒N，N′-烯酰 CP,97%4-吡啶-4-基甲 98%銅片
白介33(IL-33)ELISA試劑盒N，N′-烯酰 for electrophoresis, ≥99.0% (T)4-甲氧基酮 98%化亞銅(>97%,BR)
白介32(IL-32)ELISA試劑盒N，N′-烯酰 for molecular biology, ≥99.0% (T)酮 98%化亞銅(>99%,BR)
白介31(IL-31)ELISA試劑盒 嗎啉乙磺,一 分子生物學級, ≥99% (T)酮 99%2'-脫氧鳥苷5'二二鈉鹽
白介3(IL-3)ELISA試劑盒3-(N-啉)磺 99%L-氨乙酯鹽鹽 98%D-葡萄糖鈉(> 98%，BR)
白介2誘導的T激(ITK)ELISA試劑盒嗎啉乙磺鈉鹽 99%2-羥基喹喔啉 99%乙二四乙二鈉一鈣鹽
白介2受體(IL-2R)ELISA試劑盒6-甲氧基喹啉 96%?；敲撗跄?98%聚蔗糖70
白介2受體(IL2R)ELISA試劑盒3-甲基-2-并噻唑酮腙鹽鹽，合 98%4-叔丁基芐 99%碳胍(>98%,BR)
白介2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA試劑盒酚試劑 AR,98.0%2-氨基甲叔丁酯 97%六次甲基四(>99%，BC)
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
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