化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：人皰疹病毒6型染料法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號：FS-P013523
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
Langerin/CD207/FITC 熒光標(biāo)記白細(xì)胞分化抗原CD207抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
SPA-1/SIPA-1 熒光標(biāo)記抗信號感應(yīng)增殖相關(guān)蛋白 1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh AKAP2 蛋白激A2抗體 0.2ml
Rabbit horse IgG/Bio 生物標(biāo)記的兔抗馬IgG 0.1ml
Granzyme B 顆粒B抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgM/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1ml
SPA-1/SIPA-1 熒光標(biāo)記抗信號感應(yīng)增殖相關(guān)蛋白 1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
L-LDH(Human L-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 人L-乳脫氫Multi-class antibodies： 48T
Nociceptin 孤菲肽/痛敏肽抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh IL-10 白細(xì)胞介-10抗體 0.1ml
BMP-7(Mouse Bone morphogenetic protein 7) ELISA Kit 小鼠骨成型蛋白7 96T
Protein CASP CASP抗體 0.1ml
CK1 細(xì)胞角蛋白1抗體 0.1ml
Nociceptin 孤菲肽/痛敏肽抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Donkey human IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的驢抗人IgG 0.1ml
GCP4 γ-微管蛋白GCP4抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARMCX1 ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX1抗體 0.2ml
IGF-II/FITC 熒光標(biāo)記胰島樣生長因子-II抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgG 兔抗猴IgG 1mg
Plexin A2/FITC 熒光標(biāo)記神經(jīng)叢蛋白A2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
人皰疹病毒6型染料法熒光定量PCR試劑盒50次鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
傷寒沙門氏菌種屬: Salmonella│typhi提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
多粘類芽孢桿菌種屬: Paenibacillus│polymyxa提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 28-32℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
微黃色奈瑟氏菌種屬: Neisseria│subflava提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0109生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
蛋白解誘導(dǎo)因子/皮離蛋白(PIF/DCD)ELISA試劑盒2,4-二甲基-1- 99%長春質(zhì) 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%孔雀綠
蛋白激活復(fù)合體亞基2(PSME2)ELISA試劑盒3,4-二 99%三氧化鉬 99.95%聚乙二2000
蛋白3特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體(PR3-ANCA)ELISA試劑盒4-硝基鄰二甲 99%三氧化鉬 99.95%，100nm硫代氨基脲(AR)
蛋白3抗體(PR3Ab)ELISA試劑盒3-硝基鄰二甲 99%二硫化鉬 AR,99%化亞鐵四(AR)
蛋白3(PR3)ELISA試劑盒草高鐵銨 98%鉬粉 99.5% metals basis，2μm烏來糖;氨乙酯
蛋白1調(diào)控/抑制因子亞基1A(PPP1R1A)ELISA試劑盒硫亞鐵銨，六 AR，99.5%砷 99.995% metals basis鉬
蛋白(PP)ELISA試劑盒硫高鐵銨,十二 AR，99.0%砷標(biāo)準(zhǔn)溶液 濃度范圍:0.444(mg/L) ±0.028mg/L酮激
蛋白酪氨1B(PTP1B)ELISA試劑盒乙基纖維 電子級對氨基胂 98%甲磺依普羅沙坦;依普沙坦
蛋白酪氨(PTP/PTPase/CD148)ELISA試劑盒鞣花 96%對氨基胂 分析標(biāo)準(zhǔn)品鹽甲脒
蛋白酪氨激(PTK/CD115)ELISA試劑盒沒食子乙酯 98%三氧 AR（劇品）化鉻;三化鉻
蛋白酪氨激(PTK)ELISA試劑盒熒光 IND三氧 CP（劇品）肌一
蛋白聚糖4(PRG4)ELISA試劑盒檸檬鐵 AR三氧 PT（劇品）右旋糖苷/葡聚糖10
蛋白聚糖(PG)ELISA試劑盒檸檬鐵 培養(yǎng)級三氧 99.99%（劇品）三(羥甲基)氨乙鹽
蛋白精氨脫亞氨4(PADI4)ELISA試劑盒硫鐵 AR，F(xiàn)e 21-23 % 98%（劇品）檸檬鐵銨
蛋白精氨甲基轉(zhuǎn)移1(PRMT1)ELISA試劑盒硫亞鐵，七 ACS, ≥99.0%亞鈉 99.99%（劇品）化
蛋白激C(PKC)ELISA試劑盒石蕊 AR亞鈉 CP（劇品）D-葡萄糖內(nèi)酯
化工儀器網(wǎng)