化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
實驗外包:
1.基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué)：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測：Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學(xué)：GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型：原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
50次 | FS-P013528 |
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
使用方法：
一、稀釋PCR陽性對照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例） 1. 注意：由于標(biāo)準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。 2. 標(biāo)記6個離心管，分別為7，6，5，4，3，2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 5. 換槍頭，在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 6. 換槍頭，在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個樣品，必須設(shè)置N+2個提取， 多出的一個是PC（樣品制備陽性對照）， 一個是NC（樣品制備陰性對照）。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號（濃度為1×10E4 拷貝/μL，10μL相當(dāng)于1萬拷貝）或第5號（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當(dāng)于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)（20 μL體系，在樣品制備室進行） 10. 如果只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+9個PCR管，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品，1個用于PCR陰性對照，6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù)，則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加）
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PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
Phospho-Lamin A/C (Ser22) /FITC 熒光標(biāo)記磷化核纖層蛋白A/C抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Sox2/FITC 熒光標(biāo)記胚胎干細胞關(guān)鍵蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh AKAP95/AKAP8 蛋白激A錨定蛋白95抗體 0.1ml
Rabbit horse IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗馬IgG 0.1ml
GAPDH 3-磷甘油脫氫 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgM/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1ml
Sox2/FITC 熒光標(biāo)記胚胎干細胞關(guān)鍵蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
ER- Beta/FITC 熒光標(biāo)記雌受體β抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
MUC5AC/Mucin 5AC /FITC 熒光標(biāo)記胃粘液抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh C1GALT1 N-乙酰半乳糖胺糖蛋白3、β-半乳糖轉(zhuǎn)移1抗體 0.2ml
Substance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1) P物質(zhì)受體(抗原) 0.5mg
Protein atonal homolog 8 螺旋環(huán)螺旋轉(zhuǎn)錄因子HATH6抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh RPL5 核糖體蛋白L5抗體 0.2ml
MUC5AC/Mucin 5AC /FITC 熒光標(biāo)記胃粘液抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Donkey human IgG/Bio 生物標(biāo)記的驢抗人IgG 0.1ml
Genethonin 1 淀粉結(jié)合域蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Aromatase 芳香化/細胞色P450/雌合成抗體 0.1ml
IFNGR2/FITC 熒光標(biāo)記干擾-gamma受體2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗猴IgG 0.1ml
Insulin/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記胰島抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
人皰疹病毒8型探針法熒光定量PCR試劑盒50次白地霉種屬: Geotrichum│candidum提供形式: 斜面培養(yǎng)物；凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 13生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
類志賀鄰單胞菌種屬: Plesiomonas│shigelloides分離基物: 狗糞便提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: yes培養(yǎng)基: 848生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
解脂亞羅酵母種屬: Yarrowia│lipolytica提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
大腸埃希氏菌(大腸桿菌)種屬: Escherichia coli提供形式: 凍干粉安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 組氨、異亮氨、纈氨缺陷型培養(yǎng)基: 營養(yǎng)肉汁瓊脂：蛋白胨 10.0 g，牛肉提取物 3.0 g，NaCl 5.0 g，瓊脂 15.0 g，蒸餾 1.0 L，pH 7.0生長條件: 35-37℃，好氧
促腎上腺皮質(zhì)(ACTH)ELISA試劑盒超細鉑粉 99.9%,平均粒度:0.1-0.5μm甘露 超純級，≥99.0%(HPLC)十二基磺鈉(>95%,Tech Grade)
促腎上皮質(zhì)釋放(CRH)ELISA試劑盒鉑標(biāo)準溶液 1000μg/ml麥芽糖 95%硅鈉九(>98%，BR)
促卵泡(FSH)ELISA試劑盒銀 99.9%，≤0.1μm甘露 植物培養(yǎng)級,≥99.0%（GC)多聚鈉(>98%，BR)
促甲狀腺受體抗體(TRAb)ELISA試劑盒銀 99.95%，1.0μm果膠 半乳糖(干基計)≥74.0 %鹽三(>98%，BR)
促甲狀腺受體(TSHR)ELISA試劑盒銀 99.9%,≤0.5μmD-山梨 AR,98.0%5-溴-3-吲哚基-β-D-吡喃半乳糖苷(>98%,BR)
促甲狀腺釋放(TRH)ELISA試劑盒質(zhì)銀標(biāo)樣 分析標(biāo)準品D-山梨 分析標(biāo)準品, >99.5% (HPLC)氫二鈉二
促甲狀腺(TSH)ELISA試劑盒銀 99.5%，60-120nmD-山梨 用于分子生物學(xué), ≥98%中性蛋白
促黃體(LH)ELISA試劑盒銀粉 99.99% metals basis，≤0.1μmD-山梨 用于培養(yǎng)，≥98%聚乙二200
促紅生成(EPO)ELISA試劑盒異辛 99%D-山梨 超純級，≥99.5% (HPLC)銻(> 98%,BR)
促分裂原活化蛋白激激活的蛋白激3(MAPKAPK3)ELISA試劑盒庚 98%D-山梨 用于細植物胞培養(yǎng)，≥98%結(jié)晶碳鈉(>99%,BR)
雌一(E1)ELISA試劑盒異丁 99%DL-α-酚 96%中性氧化鋁(BR)
雌酮(estrone,E1)ELISA試劑盒辛 99%4,6-三(3,5-二叔丁基-4-羥基芐基) 99%D-(>99%，BC)
雌三(E3)ELISA試劑盒三辛 90%(+)-δ-酚 90%吲哚(>98%,BR)
雌受體β(ESR2)ELISA試劑盒三辛 離子對試劑酚乙酯 分析標(biāo)準品硫鋰(>98%,BR)
雌受體(ER)ELISA試劑盒三辛 98%酚乙酯 ≥96% (HPLC)硫柳汞鈉鹽
雌硫轉(zhuǎn)移(SULT1E1)ELISA試劑盒三異辛 98%木糖 99%硅粉(>99%，BR)
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