【p糖蛋白(p-gp)簡介】：是細胞膜的一種 重要蛋白，由 ABCB1 基因編碼，將許多外來物質(zhì)從細胞中抽出。它也是一 種 170 kDa 的跨膜糖蛋白，其中包括 10-15 kDa 的 N 端糖基化。分子的 N 端一半包含 6 個跨膜結(jié)構(gòu)域，然后是一個帶有 ATP 結(jié)合位點的大的細胞質(zhì)結(jié) 構(gòu)域，然后是第二部分，有 6 個跨膜結(jié)構(gòu)域和一個 ATP 結(jié)合位點，與多肽的 前一半有超過 65%的氨基酸相似性。

【產(chǎn)品用途】：本試劑盒僅供科研使用，定量檢測細胞液、體液、組織、血清、血漿等標本中大鼠p糖蛋白(p-gp)的含量。凡訂購我司任意一款試劑盒均享受免費代測服務(wù)，歡迎咨詢、訂購！

常見樣本處理及要求：

【血清樣本】：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置 2 小時或 4℃過夜，然后 1000×g 離心 20 分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

注意事項：收集血液樣本應(yīng)避免溶血，因為紅細胞在溶解時會釋放具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，這種情況下，ELISA實驗中將會出現(xiàn)非特異性顯色反應(yīng)，導(dǎo)致檢測結(jié)果不準確，出現(xiàn)假陽性結(jié)果。另外，樣本還應(yīng)避免細菌污染，因為細菌可能含有內(nèi)源性HRP，也會導(dǎo)致檢測結(jié)果不準確。

【血漿樣本】：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

注意事項：檢測前請仔細閱讀ELISA試劑盒說明書，查看該試劑盒針對抗凝劑是否有特殊要求。

【細胞培養(yǎng)物上清】：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

【樣品保存】：樣品收集后若在1周內(nèi)進行檢測的可保存于4℃，若不能及時檢測，請按一次使用量分裝，凍存于-20℃（1個月內(nèi)檢測），或-80℃（6個月內(nèi)檢測），避免反復(fù)凍融，標本溶血會影響最后檢測結(jié)果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。

大鼠p糖蛋白(p-gp)ELISA試劑盒 定量檢測組成：（檢測范圍請參考說明書）

注意：使用前請檢查試劑盒中試劑的標簽和數(shù)量與表格是否一致。

大鼠p糖蛋白(p-gp)ELISA試劑盒 定量檢測操作流程如下：

【平衡試劑盒至常溫】：取出實驗過程中所需板條，剩余半條用自封袋密封放回4攝氏度。

【加樣】：設(shè)置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL。在樣本孔先加樣本10μl再加稀釋液40μl，（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）
【加酶】：標準品孔和樣本孔總每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL空白孔除外。
【溫育】：用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃恒溫箱溫育60分鐘。
【配液】：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
【洗滌】：小心揭掉封板膜，棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置60秒后甩去洗滌液，吸水紙上拍干。如此重復(fù)5次（也可用洗板機洗板）。

【顯色】：每孔先加入底物溶液A 50μl，再加入底物溶液B 50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光孵育15分鐘。
【終止】：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
【測定】：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

【說明】：電子版說明書僅供參考，實際操作請按照隨產(chǎn)品發(fā)送的印刷版說明書。中英文說明書可能會有不一致的地方請以英文說明書為準。

請嚴格按照產(chǎn)品說明書操作，如需產(chǎn)品說明書可直接來電索取或添加客服索取。